研究报告/Research Report

枣不同组织提取RNA方法的比较及优化  

康亚璇 , 陈武 , 庞晓明 , 李颖岳*
北京林业大学林木育种国家工程实验室, 生物科学与技术学院, 林木与花卉育种教育部重点实验室, 北京, 100083
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2015 年, 第 13 卷, 第 30 篇   doi: 10.13271/j.mpb.013.002871
收稿日期: 2015年08月19日    接受日期: 2015年08月31日    发表日期: 2015年12月28日
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摘要

为了获得高质量的枣 RNA,本研究从所得 RNA 的纯度与浓度、操作时间和成本等方面比较了Trizol试剂法、传统CTAB法、热硼酸法、试剂盒法以及改良CTAB5种方法提取枣不同组织总 RNA 的效果,并筛选出了最适合提取枣不同组织样品 RNA 的具体方法。结果表明:(1)在本研究试验的5种提取方法中,枣不同的组织RNA提取需要不同的方法。枣组培苗RNA提取的最佳方法是热硼酸法,枣芽和幼叶是试剂盒法,花和果实需要用改良CTAB法。(2)通过正交试验,得出枣树花和果实RNA提取适宜的改良CTAB法为在原有CTAB法的基础上水浴20 min、加入NaAcpH值为4.8、加入2倍体积的异丙醇。(3)RNA提取过程中的其他条件包括:RNA储存液保存的材料提取出的RNA质量最高,使用TBE缓冲液替代TAE进行电泳可以提高RNA的电泳亮度,4低温离心更有利于组培苗和芽的总RNA的提取,而叶片、花以及果实的RNA提取室温即可。

关键词
枣(Ziziphus jujuba Mill.);总RNA;组织;改良CTAB

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《分子植物育种》印刷版
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